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  • 杂志名称:中国现代医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
  • 国际刊号:1005-8982
  • 国内刊号:43-1225/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国现代医学杂志2002年第15期

人NT-3重组逆转录病毒载体及稳定包装细胞系的构建及鉴定

吕海侠;刘勇;李敏杰;王全颖;杨广笑

关键词:NT3, 逆转录病毒载体, 基因重组
摘要:目的:构建并鉴定携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系.方法:用DNA重组技术将人NT-3定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切鉴定;磷酸钙转染方法将重组的逆转录病毒转染入包装细胞系PA317,G418筛选建立稳定产病毒的细胞株.结果:构建的重组逆转录病毒载体可以被限制性内切酶EcoR I和BamHI切开,电泳分离显示两条阳性条带,分别出现于0.8kb和5.9kb处;重组载体转染包装细胞,经G418筛选,可形成抗性克隆,并测得病毒滴度为4×105cfu/ml,提示构建携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系成功.结论:构建携带人NT-3基因的逆转录病毒载体可行,并且可望成为一种很好的对神经系统疾病进行基因治疗的方法.