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  • 杂志名称:中国现代医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
  • 国际刊号:1005-8982
  • 国内刊号:43-1225/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国现代医学杂志2007年第14期

人IκBαM真核表达载体的构建及其对大鼠肝移植缺血再灌注中ICAM-1的影响

秦涛;潘延凤;张宏伟

关键词:肝移植, 缺血再灌注损伤, 突变型IκBα, 真核表达载体
摘要:目的 构建人IκBαM真核表达质粒,探讨人IκBαM对大鼠肝移植缺血再灌注中ICAM-1的影响.方法 应用RT-PCR和重叠延伸pCR技术,得到点突变的人IκBαM,定向克隆至PcDNA3.0真核表达载体.将SD大鼠原位肝移植模型分4组:组Ⅰ为假手术组(行游离肝脏手术),组Ⅱ为空白对照组(行大鼠原位肝移植手术),组Ⅲ为PcDNA3.0空载体转染组(移植前两天行人PcDNA3.0转染供肝),组Ⅳ为PcDNA3.0-IκBαM转染组(移植前两天行人PcDNA3.0-IκBαM转染供肝).分别于术后2 h、12 h、24 h和3 d取材.应用免疫组化、RT-PCR测定肝组织中ICAM-1的表达,同时检测各时点肝脏酶学的变化.结果 经酶切和DNA序列测定鉴定,证实重组质粒构建正确;PcDNA3.0-IκBαM转染组与组Ⅱ、组Ⅲ相比:免疫组化示ICAM-1于移植后12 h、24 h的表达差异具有显著性;术后12 h ICAM-1mRNA的表达水平具有显著性差异;肝脏受损指标(ALT)在各时点差异具有显著性,尤其在术后12 h为显著(P<0.05).各移植组与Ⅰ组差异有显著性,(P<0.05).结论 真核表达质粒PcDNA3.0-IκBαM构建成功,IκBαM通过抑制ICAM-1的表达减轻大鼠肝移植缺血再灌注损伤.