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  • 杂志名称:中国现代医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
  • 国际刊号:1005-8982
  • 国内刊号:43-1225/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国现代医学杂志2009年第07期

pSiRNA-D114逆转录病毒载体的构建及对骨肉瘤UMR106细胞D114蛋白表达的作用

许自力;邓展生;全必春;许宇霞

关键词:pSiRNA-D114逆转录病毒载体, 骨肉瘤, 基因治疗
摘要:目的 建立逆转录病毒介导的人D114基因RNA干扰体外表达体系并观察对骨肉瘤UMRl06细胞的作用.方法 将人Dil4基因RNAi双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒psilencer 5.1-H1 R.etro中,构建成携带人D114基因RNAi逆转录病毒载体pSiP,NA-D114,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染骨肉瘤细胞UMR106.用Westem blot分别检测对转染细胞人D114蛋白表达的影响.结果 重组pSiR.-NA-D114质粒经测序鉴定正确.重组逆转录病毒滴度可达221×104cfu/mL,感染UMR106骨肉瘤细胞3 d能明显抑制细胞Dll4蛋白表达,其表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组.结论 成功构建了沉默D114表达的载体pSiRNA-D114,并且该载体能有效地敲低骨肉瘤细胞D114基因表达.