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  • 杂志名称:中国现代医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
  • 国际刊号:1005-8982
  • 国内刊号:43-1225/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国现代医学杂志2010年第03期

一种简单的慢病毒载体介导的同时沉默双某因的方法

左雨娜;焦德敏;于慧慧;张铸业;李宙阳;袁军;刘爱和;王彦刈

关键词:shRNA, 慢病毒栽体, 双基因沉默
摘要:目的 建立一种简单的慢病毒栽体介导的同时沉默双基因的方法.方法 该研究在慢病毒载体的3'LTK区同时插入沉默两个基因p18和MAD1的shRNA(Small hairpin RNA),通过包装细胞293T和包装质粒包装成假病毒颗粒,感染NIH/3T3细胞.其沉默基因的效果用Western blotting来检测.结果 栽体构建成功,被感染的NIH3T3细胞中,p18和MAD1基因的蛋白表达被显著抑制.结论 该栽体构建方法操作简单,无需PCK,及多次连接反应,且可达到两种基因同时被稳定、高效沉默的目的 ,为相关研究提供了方便.