期刊简介
本刊刊登基础医学、预防医学与相关的科技新理念、新成果、新技术等研究论文和医学管理方面论文。
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首页>中国现代医学杂志
- 杂志名称：中国现代医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
- 国际刊号：1005-8982
- 国内刊号：43-1225/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
肝素联合层黏连蛋白对大鼠脂肪间充质干细胞向运动神经元分化的影响
姚克；李德华；刘学元；房艳
关键词：脂肪间充质干细胞, 肝素, 层黏连蛋白, 运动神经元, 诱导
摘要：目的 研究单独或联合应用肝素(heparin)与层黏连蛋白(laminin)对大鼠脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)向运动神经元分化的影响.方法 用酶消化法分离纯化SD大鼠AD-MSCs,取传至第3代的AD-MSCs,检测表面抗原CD31、CD44、CD49d及CD106的表达情况,MTT法检测增殖活性.根据处理因素不同为4组:空白对照组,不加任何诱导剂;L组(laminin组),加入1μg/ml层黏连蛋白;H组(heparin组),加入50μg/ml肝素;HL组(heparin+laminin组),加入50μg/ml肝素和1μg/ml层黏连蛋白.细胞诱导后第15天,观察细胞形态的变化;采用免疫细胞化学方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Hb9和ChAT的表达,比较各组抗体的阳性率.诱导后3、6、9、12和15d分别收集各组细胞,ELISA法检测细胞内Ach的含量.结果 原代细胞为贴壁生长的长梭形细胞,流式细胞仪检测结果显示,CD44高表达,CD49d低表达,CD31、CD106阴性.MTT法结果表明AD-MSCs经多次传代培养后,其增殖能力没有明显降低.空白对照组和L组细胞诱导后形态变化不明显,NSE阳性表达率均很低,两者之间无明显差别.H组和HL组细胞诱导第15天后具有神经元样形态;NSE的阳性表达率比其他两组明显增多.H组和HL组细胞诱导后可见Hb9表达阳性,阳性率分别为为6.89％和30.47％,ChAT阳性率分别为10.83％和39.36％,其他两组无Hb9和ChAT表达,各组的GFAP均低表达.ELISA检测结果显示,对照组和L组诱导后细胞不表达乙酰胆碱(Ach),而H和HL组自诱导后第9天起表达Ach,且随着诱导时间的延长逐渐增加,到第15天时分别达到1.27和4.98ng/ml.结论 肝素联合层黏连蛋白能显著促进大鼠AD-MSCs向运动神经元分化.
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