期刊简介
本刊刊登基础医学、预防医学与相关的科技新理念、新成果、新技术等研究论文和医学管理方面论文。
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首页>中国现代医学杂志
- 杂志名称：中国现代医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
- 国际刊号：1005-8982
- 国内刊号：43-1225/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
MicroRNA-29b-3p重组腺相关病毒制备及在大鼠前额叶皮质中的表达研究
李茂；冯建国；王晓斌；陈前修；万运强
关键词：腺相关病毒, miRNA-29b-3p, 前额叶皮质, 大鼠
摘要：目的 获得表达microRNA-29b-3p的重组腺相关病毒(rAAV-miR-29b-3p),并检测其在大鼠前额叶皮质中的感染效果和表达水平.方法 将前体miR-29b-3p基因片段置入AAV表达质粒中构建重组AAV质粒,将重组AAV质粒、包装质粒和辅助质粒通过脂质体LipaFiterTM共转染HEK293细胞包装rAAV-miR-29b-3p.从转染的HEK293细胞中收集并通过树脂柱纯化rAAV-miR-29b-3p,通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定rAAV-miR-29b-3p滴度.通过脑立体定位仪注射rAAV-miR-29b-3p至大鼠前额叶皮质,免疫荧光显微镜观察rAAV-miR-29b-3p的感染效果,qRT-PCR检测rAAV-miR-29b-3p表达水平.结果 成功包装的rAAV-miR-29b-3p经纯化后获得了高纯度的rAAV-miR-29b-3p,qRT-PCR检测rAAV-miR-29b-3p的病毒滴度达到1.0×1012 vg/ml,经感染21 d后,脑组织前额叶皮质荧光表达明显,miR-29b-3p表达水平明显提高.结论 构建的rAAV-miR-29b-3p可使大鼠前脑皮层miR-29b-3p高表达,为进一步研究miR-29b-3p的生物学功能提供了有效工具.
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