期刊简介
本刊刊登基础医学、预防医学与相关的科技新理念、新成果、新技术等研究论文和医学管理方面论文。
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首页>中国现代医学杂志
- 杂志名称：中国现代医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
- 国际刊号：1005-8982
- 国内刊号：43-1225/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
外周血捕获循环肿瘤细胞的有效方法研究
周洲；李良平；高采平；钟应佳；翟祎星；赖兵
关键词：循环肿瘤细胞, 免疫磁珠法, 显微操作
摘要：目的 建立有效获取肿瘤患者外周血中单个循环肿瘤细胞(CTC)的方法.方法 预先将经DiI染色的SW480细胞混入健康成人的抗凝全血中,分别单独采用密度梯度离心(OncoQuick)、淋巴细胞分离术(Fi-coll)、“玫瑰花富集”(RosetteSep)、免疫磁珠(CELLection)及淋巴细胞分离术联合免疫磁珠联用(Ficoll+CEL-Lection)富集这些肿瘤细胞,统计回收率并观察纯度以进行比较.再使用显微操作仪捕获单个NCI-H460、HCT-116、DLD-1、SW480、TF-1等探测细胞及从肝癌患者外周血中富集获得的CTC,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术分析单细胞的CD45 mRNA表达水平.结果 5组方法的肿瘤细胞回收率分别为(52.5±3.5)％、(46.6±1.9)％、(36.9±5.5)％、(14.1±3.1)％和(8.8±1.4)％;单因素方差分析表明,5组方法回收率比较差异有统计学意义(P ＜0.05);SNK q检验表明,除OncoQuick组和Ficoll组(P＞0.05)、CELLection组和Ficoll+CELLection组(P＞0.05)外,其他各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05).在荧光显微镜下观察富集的肿瘤细胞,发现CELLection组及Ficoll+CELLection组的纯度更高.qRT-PCR结果显示,总循环数60,GAPDH Ct均值为(29.94±0 59),除了单个TF-1细胞的CD45 Ct均值为(34.21±0.22),其他单个探测细胞及CTC的CD45均无表达.结论 CELLection即免疫磁珠法配合显微操作能有效获取肝癌患者外周血中的单个CTC并保留其原始的分子特性,适用于后续单细胞分析与研究.该方法为CTC运用于剖析肿瘤分子的特征、评价靶向治疗药物的药效以及监控肿瘤的复发与转移等临床问题奠定了基础.
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