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  • 杂志名称:中国现代医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心
  • 国际刊号:1005-8982
  • 国内刊号:43-1225/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:2000年、2002年二次被省科技厅、省新闻出版局评为一级期刊期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国现代医学杂志2018年第32期

MicroRNA-486和TGF-β1对人主动脉瓣膜钙化的影响及其机制研究

蒋伟坚;方明;苏锦文;王温慧;王雪君;李新明

关键词:心脏瓣膜疾病, microRNA-486, 转录生长因子-β1, 茜红素染色, 碱性磷酸酶活性, 主动脉瓣膜
摘要:目的 研究microRNA-486(miRNA-486)对人主动脉瓣膜间质细胞(VICs)钙化的影响及作用机制.方法 体外培养VICs,经成骨诱导后用双荧光素报告基因检测miRNA-486靶基因.转染miR-486 mimic、miR-486 Inhibitors后,将细胞分为miR-486 mimic组、miR-486 mimic NC组、miR-486 Inhibitors组、miR-486 Inhibitors NC组.采用茜红素染色、ALP试验分析各组钙化程度,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫荧光试验检测miR-486靶基因及成骨相关因子mRNA和蛋白的表达水平.结果 双荧光素报告基因检测和Western blot检测结果显示,转录生长因子-β1(TGF-β1)为潜在靶基因.茜红素染色、ALP试验结果显示,miR-486 mimic组钙化程度高于miR-486 Inhibitors组.qRT-PCR、免疫荧光试验结果表明,miR-486 mimic组TGF-β1、SMAD3 mRNA和蛋白表达水平较低(P<0.05);miR-486 mimic组RUNX2、骨钙素mRNA表达水平较miR-486 Inhibitors组高(P<0.05).结论 miR-486可通过下调TGF-β1的表达,促进RUNX2、骨钙素的表达和活性,诱导间质细胞向成骨细胞分化.